項(xiàng)目概況:漆酶(Laccase)是一種含銅的多酚氧化酶,。在20世紀(jì)90年代,,成為科學(xué)家的研究熱點(diǎn)之一,。微生物所已經(jīng)獲得了漆酶高產(chǎn)菌株,,分離提純了漆酶干粉,,實(shí)驗(yàn)室內(nèi)技術(shù)成熟,。此項(xiàng)工作已經(jīng)進(jìn)行過2升發(fā)酵罐試驗(yàn),,為了進(jìn)一步提高漆酶活性,目前正在利用分子生物學(xué)技術(shù),,進(jìn)行白腐菌蛋白表達(dá)分泌系統(tǒng)的構(gòu)建,,初步建立白腐菌DNA轉(zhuǎn)化法,成功分離白腐菌漆酶基因及其啟動(dòng)子和終止子序列,,以潮霉素基因?yàn)閳?bào)告基因,,以漆酶基因的終止子和啟動(dòng)子構(gòu)建了表達(dá)載體。還進(jìn)行了白腐菌插入突變體庫(kù)的建立及漆酶表達(dá)相關(guān)基因的研究,,初步建立了根癌農(nóng)桿菌介導(dǎo)方法轉(zhuǎn)化白腐菌,,并進(jìn)行了二元載體的構(gòu)建。技術(shù)創(chuàng)新點(diǎn):微生物所獲得了漆酶高產(chǎn)白腐菌菌株,,該菌株與其他國(guó)內(nèi)已報(bào)道的產(chǎn)生漆酶的真菌菌株相比,,有以下優(yōu)勢(shì):第一,在誘導(dǎo)條件下,,其搖瓶發(fā)酵漆酶最高活性為125U/ml,,在國(guó)內(nèi)遙遙領(lǐng)先;第二,,發(fā)酵液中不含有同工酶,,這利于提取分離純化漆酶,減少純化步驟,降低純化成本,。我們對(duì)發(fā)酵液進(jìn)行了漆酶蛋白分離純化,,得到了電泳級(jí)純度的漆酶蛋白,其分子量為64.65KD,,等電點(diǎn)為3.7,,純度非常高,為藍(lán)色的漆酶干粉,,在700以下很穩(wěn)定,。主要應(yīng)用范圍:適用領(lǐng)域主要有以下6個(gè)方面:第一、適用于紙漿造紙工業(yè),。漆酶在紙漿生產(chǎn),,特別是草漿造紙中,能夠去除木質(zhì)素和生物漂白,,有助于造紙業(yè)最終實(shí)現(xiàn)清潔生產(chǎn),。目前漆酶用于紙漿漂白研究最熱門,進(jìn)展最顯著,,被認(rèn)為是最具有應(yīng)用前景的酶,; 第二、適用于木材加工行業(yè),。木材表面通過自身組分在漆酶的作用下活化,,產(chǎn)生膠合作用,替代化學(xué)膠合劑或其它化學(xué)品,,生產(chǎn)人造板,。即用無污染低耗能的酶學(xué)方法替代污染嚴(yán)重的化學(xué)方法,為開發(fā)新型環(huán)保,、無毒綠色的人造板產(chǎn)品,,實(shí)現(xiàn)無膠膠合,解決游離甲醛污染問題奠定基礎(chǔ),; 第三,、適用于環(huán)境保護(hù)領(lǐng)域。漆酶能夠在污染的水和土壤中去毒,,或除去各種芳香污染物和工業(yè)污染物中的異生素,。用漆酶進(jìn)行污染土壤整治和修復(fù)。漆酶可以處理紡織工業(yè)染料廢水,。真菌漆酶對(duì)異生芳香化合物有獨(dú)特的降解作用,可用于染料廢水的處理,、多環(huán)芳香化合物的降解、氯化芳香化合物的降解以及含酚廢水的處理,。而且,,從白腐真菌中分離的漆酶還可以降解偶氮,、靛藍(lán)、三苯甲烷等23種工業(yè)染料,。 第四,、適用于飲料和食品的加工行業(yè)。漆酶可以在飲料中去除酚類化合物,,使果汁清亮、穩(wěn)定,。 第五,、適用于能源領(lǐng)域。用漆酶進(jìn)行煤的脫硫,。 第六,、基于漆酶催化的光纖傳感器進(jìn)行漆酶固定化的研究。用納米復(fù)合粒子通過戊二醛交聯(lián)法固定了漆酶,固定后的酶比游離酶具有更好的貯存穩(wěn)定性及操作穩(wěn)定性,。為研制高性能的光纖生物傳感器打下了較好的基礎(chǔ),。 合作方式:面議 |